目的:利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建MLH1 购买Tucidinostat 基因敲除的微卫星不稳定鼠源性结肠癌细胞Mc38和鼠源性乳腺癌细胞4T1,为研究微卫星不稳定肿瘤在抗肿瘤免疫治疗过程中的作用机制提供细胞模型。方法:设计2条特异性靶向MLH1基因的SgRNA序列，构建lentiCRISPRv2-SgRNA重组质粒载体，经PCR、测序鉴定；将lentiCRISPRv2-SgRNA重组质粒载体分别和慢病毒包装骨架质粒pMD2.G、psPAX2共转染293T细胞构建lentiCRISPRv2-SgRNA慢病毒载体；利用lentiCRISPRv2-Sg 3MA RNA慢病毒载体分别感染Mc38、4T1细胞，经嘌呤霉素和96孔板流式分选筛选出阳性单克隆细胞后PCR、Western Blot和测序鉴定；MLH1~(-/-)Mc38细胞、MLH1~(-/-)4T1细胞连续培养约70 d,经荧光PCR-毛细管电泳进行微卫星状态检测，筛选MLH1基因敲除的微卫星不稳定Mc38、4T1细胞。结果:测序结果表明成功构建lentiCRISPRv2-SgRNA重组质粒载体；PCR、Western Blot和测序结果表
趋磁细菌体内可合成一种磁性纳米颗粒——磁小体（bacterial magnetic partic Pim抑制剂 les,BMPs），与人工纳米材料相比，BMPs具有晶型稳定、粒径分布范围窄（25～55 nm）、成分单一（Fe3O4）且有质膜包被、磁靶向性以及低毒等特点。利用磁小体膜蛋白和表面的活性氨基、羧基等，可以对磁小体进行化学修饰或生物修饰，将其改造成纳米级载体，在动、植物、人体病原的免疫检测、癌症的早期诊断、磁热疗、磁分离、医学成 点击此处 像等方面均具有潜在应用价值。在防治慢性疾病方面，中医药拥有理、法、方、药统一的理论体系以及针灸、 确认细节 推拿等多种非药物治疗手段，
人表皮生长因子受体-2（humanepidermalgrowthfactorreceptor2，HER-2）阳性乳腺癌因HE selleck产品 R-2的过表达而具有高侵袭转移潜能，并导致患者的不良预后。靶向HER-2治疗药物如曲妥珠单抗、帕妥珠单抗、恩美曲妥珠单抗的上市显著延长了患者的无病生存期（Diseasefreesurvival，DFS）。然而，频发的多药耐药、肿瘤的复发转移以及辅助治疗带来的心脏毒性、胃肠道不适等不良反应，仍然是HER-2阳性乳腺癌的治疗挑战。中医药对于乳腺癌的认识源远流长，在几千 年的传承与创新发展中，已逐步形成具有中医药特色的规范化治疗体系，在乳腺癌治疗中表现出独特优势及显著疗效。中医药理论指导下的“辨证施治”、“分期分型论治”、“因人制宜”、“根 STI571分子量 据癌毒邪气从化的不同分脏腑论治”等治疗原则，与现代个体化精准治疗的理念不谋而合。本文基于HER-2阳性乳腺癌中存在的“多药耐 selleck激酶抑制剂 药、肿瘤复发转移、心脏毒性、胃肠道不适”等治疗难点，从中医学对乳腺癌术后“扶正兼以祛邪、辨证施治”的基本治疗理念出发，梳理归纳中医药在“逆转HER-2阳性乳腺癌靶向